Optimisation de la culture à long terme de motoneurones spinaux humains dérivés d'iPSC à l'aide d'un substrat dendritique à base de polyglycérol aminé
Les cellules souches pluripotentes induites humaines (hiPSC) dérivées d'individus sains et malades peuvent donner naissance à de nombreux types de cellules, ce qui facilite l'étude des mécanismes de développement, la modélisation des maladies humaines et la validation précoce des cibles médicamenteuses. Dans ce contexte, des systèmes modèles expérimentaux basés sur des motoneurones (MN) dérivés de hiPSC ont été utilisés pour étudier les maladies MN telles que l'atrophie musculaire spinale et la sclérose latérale amyotrophique. La modélisation des maladies des MN à l'aide d'approches basées sur les hiPSC nécessite des conditions de culture capables de récapituler dans un plat les événements qui sous-tendent la différenciation, la maturation, le vieillissement et la mort des MN. Les applications actuelles basées sur les MN dérivées des hiPSC sont souvent entravées par les limites de notre capacité à surveiller la morphologie, la survie et d'autres propriétés fonctionnelles des MN sur une période prolongée, ce qui souligne la nécessité d'améliorer les conditions de culture à long terme. Nous décrivons ici une méthode basée sur un substrat dendritique de polyglycérol amine (dPGA) cytocompatible pour la culture prolongée de MNs dérivées de hiPSC. Nous démontrons que les MNs cultivés sur des plats recouverts de dPGA se prêtent mieux à l'étude à long terme de la viabilité cellulaire, de l'identité moléculaire et de l'activité électrophysiologique spontanée du réseau. La présente étude a le potentiel d'améliorer les études basées sur les hiPSC de la biologie et de la maladie des MN humains.
Nous décrivons l'utilisation d'un nouveau substrat de revêtement offrant des conditions améliorées pour les cultures à long terme des motoneurones humains dérivés des iPSC, permettant ainsi l'évaluation de la viabilité cellulaire, de l'identité moléculaire, de l'activité électrophysiologique spontanée du réseau et du séquençage de l'ARN unicellulaire des motoneurones matures.
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