Précautions et avis de non-responsabilité
Ce produit est destiné uniquement à la recherche et au développement, et non à des fins pharmaceutiques, domestiques ou autres.

Stockage/Stabilité
Le dPGA est très stable et peut être stocké à long terme à 4 °C.

Préparation du bouillon
Dans des conditions stériles, diluez le dPGA jusqu'à obtenir une solution mère de 1 mg/ml avec du ddH20 stérile. Une solution stérile de 1
La solution mère mg/ml peut être conservée à 4 °C à long terme (jusqu'à 2 ans).

Protocole de revêtement de dendrimère
Culture cellulaire :
Lors de l'utilisation du dPGA comme revêtement pour favoriser la fixation des cellules au substrat, les conditions optimales
doit être déterminé pour chaque lignée cellulaire et application.
1. Dans des conditions stériles, diluez la solution mère de dPGA à 1 mg/ml jusqu'à une concentration finale
de 50 μg/ml (dilution 1:20) dans du 1XPBS stérile. La concentration finale de la solution de revêtement
peut varier de 10 à 100 μg/ml. Nous recommandons d'utiliser une concentration de dPGA qui est la
même que la concentration de poly-lysine dans des protocoles similaires.
2. Ajoutez la solution de revêtement dPGA à votre récipient de culture et incubez pendant au moins 1 heure à 37 °C
(nous recommandons de les placer dans l'incubateur à CO2 pour l'incubation).
3. Après le revêtement, retirez la solution par aspiration et lavez 3 fois avec du PBS 1X stérile.
4. Après le dernier lavage, ensemencer les cellules ou les recouvrir d'une deuxième couche de Laminine ou de Matrigel (voir
Étape 5 ci-dessous). Remarque : laissez les plaques revêtues dPGA dans 1XPBS jusqu'à leur utilisation.

Revêtement de deuxième couche avec Laminin ou Matrigel
5. Après l’étape 3 (ci-dessus), le substrat revêtu de dPGA peut être revêtu de laminine ou de Matrigel.
Par exemple : solution de laminine à 20 μg/mL ou Matrigel dans DMEM/F-12. Incuber les plaques
pendant 1 à 2 heures à 37 °C ou toute la nuit à 4 °C.

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Les dendrimères sont expédiés à température ambiante et sont stables. Lorsque vous les recevrez, nous vous conseillons de les conserver à 4°C. Ils sont stables jusqu'à 24 mois.

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Les dPGA (polyglycérol aminé dendritique) sont une famille de polymères à structure dendritique hautement ramifiée, composée de monomères de glycérol dont une partie des groupes terminaux hydroxyle du glycérol a été remplacée par des groupes fonctionnels amine. Les dPGA présentent une forte densité de charges positives à pH neutre, mais contrairement à la poly-lysine et à la poly-ornithine, ils ne contiennent pas de liaisons peptidiques et sont par conséquent très résistants à la protéolyse.

Le dPGA est un polymère synthétique. Ce n'est pas une protéine et donc, contrairement aux PLL, PDL, PLO, à la fibronectine et à d'autres substrats de revêtement à base de protéines, il ne sera pas dégradé par les protéases, ce qui garantit la stabilité de la surface revêtue de la culture cellulaire.

Les chercheurs du monde entier soulèvent de nombreuses questions sur la difficulté des cultures neuronales primaires. Certains se demandent pourquoi mes cultures neuronales primaires meurent en cours de culture. Comment puis-je les maintenir en bonne santé à long terme ? D'autres observent des amas de neurosphères/agrégats quelques jours après l'ensemencement.

Bien que de nombreux facteurs doivent être pris en considération lorsque l'on est confronté à des défis de culture cellulaire, le traitement de surface de vos vaisseaux est un facteur important.

Nos données montrent que les surfaces revêtues de dPGA peuvent supporter des cultures à long terme de neurones corticaux primaires jusqu'à 3 mois avec une densité cellulaire plus élevée, une préservation des caractéristiques physiologiques neuronales et une prévention des amas/agrégats cellulaires par rapport à PLL, PDL et PLO.

Les cellules en culture sécrètent des protéases qui dégradent les substrats à base de polypeptides comme la poly-lysine et la poly-ornithine. Avec le temps, une culture saine dégrade son propre substrat. Sur un substrat de culture sous-optimal ou dégradé, les cellules forment des amas parce qu'elles adhèrent mieux les unes aux autres qu'au mauvais substrat. Le polymère dPGA n'est pas une protéine et n'est pas dégradé par les protéases, ce qui améliore considérablement la stabilité du substrat de culture cellulaire.

Le revêtement de vos vaisseaux avec du dPGA pour les cultures neuronales primaires est simple et comparable au protocole de revêtement PDL standard.

Veuillez vous référer à notre protocole dans la section FAQ ou disponible en format PDF sur cette page https://dendrotek.ca/products/dpga

Le dPGA peut être conservé à 4°C pendant une longue période. Vous pouvez l'utiliser sur des surfaces en verre ou en plastique et les plaques de culture peuvent être pré-enduites, séchées et stockées à 4°C pendant 3 à 4 jours pour un ensemencement ultérieur de vos cellules.

Non. L’utilisation du dPGA consiste très simplement à remplacer la polylysine et la polyornithine dans votre protocole existant pour le revêtement du substrat de culture cellulaire.

Oui, vous pouvez pré-revêtement vos plaques avec dPGA.

Après le dernier rinçage au PBS, retirez le rinçage et ajoutez du PBS 1X stérile. Enveloppez vos récipients de culture dans du parafilm et conservez-les à 4°C, humides, jusqu'à 2 semaines. Assurez-vous de préserver la stérilité de vos récipients.

Nos heures de travail habituelles sont du lundi au vendredi de 9h à 17h, HNE.

Nos bureaux sont fermés les jours fériés au Québec, Canada. Les fermetures pendant les jours fériés varient d'une année à l'autre, car elles sont basées sur le calendrier des jours fériés du Québec. Veuillez cliquer ici pour obtenir une liste des jours fériés au Québec.

N'hésitez pas à contacter notre support technique à info@dendrotek.ca