Génération de motoneurones phréniques dérivés d'iPSC humains pour modéliser la dégénérescence des motoneurones respiratoires dans la SLA

La sclérose latérale amyotrophique (SLA), maladie mortelle du motoneurone, se caractérise par une dégénérescence progressive des MN. Les MN phréniques (phMN) qui contrôlent l'activité du diaphragme sont susceptibles de dégénérer dans la SLA, entraînant la mort par insuffisance respiratoire. La compréhension des mécanismes de dégénérescence des MN phréniques dans la SLA est limitée, principalement en raison de l'absence de modèles expérimentaux humains permettant d'étudier les MN phréniques. Nous décrivons ici une méthode permettant d'obtenir des MN de type phrénique à partir d'iPSC humaines (hiPSC-phMN) en 30 jours. Ce protocole utilise une combinaison optimisée de petites molécules suivie d'un tri cellulaire basé sur une protéine de surface cellulaire enrichie dans les hiPSC-phMNs, et est hautement reproductible en utilisant plusieurs lignées hiPSC. Nous montrons en outre que les hiPSC-phMNs portant l'amplification du gène C9orf72 associée à la SLA perdent progressivement leur activité électrophysiologique et subissent une mortalité accrue par rapport aux contrôles isogéniques. Ces études établissent un protocole jusqu'alors inexistant pour générer des phMNs humaines, offrant un système pertinent pour étudier les mécanismes de dysfonctionnement des MNs respiratoires.

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