Polyglycérol aminé dendrimérique (dPGA)

Précautions et avertissement
Ce produit est destiné uniquement à la recherche et au développement et ne doit pas être utilisé à des fins médicales,
comme produits ménagers ou autres usages.

Entreposage/Stabilité
dPGA est très stable et peut être stocké à long terme à 4 °C.

Préparations des stocks
Dans des conditions stériles, diluer le dPGA jusqu'à une solution stock de 1 mg/ml avec du ddH20 stérile. Une solution stock stérile de 1 mg/ml peut être conservée à 4 °C à long terme (jusqu'à 2 ans).

Culture cellulaire

Lors de l'utilisation du dPGA comme revêtement pour favoriser l'attachement cellule-substrat, les conditions optimales doivent être déterminées pour chaque lignée cellulaire et chaque application.

1. Dans des conditions stériles, diluer la solution stock de dPGA 1 mg/ml dans du 1XPBS stérile pour préparer une solution de travail à 50 μg/ml. La concentration finale de la  solution de travail pour le revêtement de surface peut varier de 10 à 100 μg/ml. Nous recommandons d'utiliser une concentration de dPGA identique à la concentration de poly-lysine dans des protocoles similaires.
2. Enduire la surface du récipient de culture avec la solution de travail dPGA. Ajouter suffisamment de solution pour couvrir la surface de culture.
3. Incuber pendant au moins 1 heure à 37°C (nous recommandons d'utiliser un incubateur à CO2).
4. Retirer la solution par aspiration et rincer 3 fois avec du 1XPBS stérile.
5. Après le dernier rinçage, ensemencer les cellules ou recouvrir le récipient de culture d'une deuxième couche de laminine ou de matrigel (voir l'étape 6 ci-dessous).
Note : Vous pouvez pré-enduire vos récipients de culture avec du dPGA. Après le dernier rinçage au PBS (étape 5), retirez le rinçage et ajoutez du PBS 1X stérile. Scellez votre matériel de culture avec du parafilm et stockez-le à 4°C pendant 2 semaines maximum. Veillez à préserver l'humidité
et la stérilité de vos récipients.

Revêtement d'une deuxième couche avec de la laminine ou du Matrigel

6. Après l'étape 5 (ci-dessus), le substrat recouvert de dPGA peut être recouvert de laminine ou de Matrigel. Procéder selon votre protocole habituel. Incuber vos récipients de culture pendant 1 à 2 heures à 37 °C ou pendant une nuit à 4 °C.